动物设施使用手册

 

 

 

           

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

内部资料

 

目录

 

常见问题Q&A

人员进出 5

人员进出注意事项 5

物品进出 6

物品进出注意事项 6

小鼠进出 7

实验操作注意事项 9

违规处理 10

物品灭菌方式对照表 12

 

 

 

 

 

 

参照SOP信息：

《SOP-AF-003-2.2动物房人员进出》

《SOP-AF-004-2.2动物房物品进出》

《SOP-AF-006-1.3动物设施实验操作规范》

《SOP-AF-015-1.2违规处理》

 

常见问题Q&A

Q:动物设施涉及各类网址

A:内网:

中心官网：http://172.21.1.136:8080/

  伦理申请：http://172.21.1.136:8080/my/control/findMyEthicalAppl
  繁育系统：http://172.21.1.136:8080/breeding/control/main

  小鼠订购：http://172.21.1.136:8080/buymice/eshop/control/main

外网:

中心官网：https://cam-su.medical.suda.edu.cn/

  伦理申请：https://cam-su.medical.suda.edu.cn/my/control/findMyEthicalAppl

  繁育系统：https://cam-su.medical.suda.edu.cn/breeding/control/main   

小鼠订购：https://cam-su.medical.suda.edu.cn/eshop/control/listProduct?productTypeId=ANIMAL_BUY

 

Q:中心网络使用说明

 

 

 

 

 

 

 

 

Q:哪些动物可以进入动物房,以及进设施要求

A:在系统订购的小鼠，在到达时会由司机通知。

订购小鼠来源	进设施要求	是否抽检
二楼进三楼	1.《外来小鼠准入申请表》	否
合作供应商	1.《外来小鼠准入申请表》 2. 随运输盒文件/信封	是，低频率抽检 抽检费用平台自理
其他来源	1.《外来小鼠准入申请表》＋2. 随运输盒文件/信封 3. 小鼠所在笼架哨兵鼠微生物检测报告	是，高频率抽检 抽检费用课题组自理

 

Q:实验动物基本使用流程

A:

顺序	步骤	负责人	备注
1	参加培训+开通账号+开通门禁	蒋其涛	提前约
2	书写AP	中心审核委员会	书写到审核周期为一个月
3	订购小鼠（系统订购/其他供应商）	蒋其涛	所有外来小鼠都需报备
4	导入小鼠	小鼠负责人	如果系统里没有的品系请联系曹文妮老师
5	开始饲养	饲养员	提供换笼+补充饮水饮食
6	小鼠繁育/分笼/剪尾/鉴定/处理	小鼠负责人	实际笼位需和系统笼位一致

 

 

Q:是否可以在设施内开展夜间实验

A:一般情况禁止在设施内开展夜间实验，确有需要的需向管理员蒋其涛报备，按照AP描述的实验内容进行审核批准后方可在设施内开展夜间实验。

 

Q:动物房门禁开通

A:经过培训考核后，903大门和三楼门禁找动物中心王贵平老师（904-4206），903二楼和设备间门禁找蒋其涛（703-3122）。

 

Q:动物房使用中出现问题

A:系统问题，打印机打印问题直接在群里找陆鑫，出现问题可以直接在沟通群里说；

表型分析仪器使用请找束慧老师（703-3122）；

其他的问题找蒋其涛（703-3122）；

 

Q:公用物品(拖鞋，公用手机，公用白卡等)意外带出动物房怎么办

A:自己送进传递仓喷消毒液照紫外，待消毒完成自己进入动物房归还到指定位置。

 

Q:动物房基本参数

A:饲养间灯光：定时器控制早8开 晚8关，请勿手动开关，其他灯光在出设施时需手动关闭

  温度范围：20-26℃

  湿度范围：40-70%

动物房使用原则

原则一： 一切进入屏障系统的人、动物、饲料、水、空气及各类物品均需要经过严格的微生物指标控制：

                  人员进入要求：在本设施前三天未进入过其他动物设施；穿戴洁净物品从人员通道进出；

                  物品进入要求：任何物品都需要经过合适的消毒手段才可以进入设施；

原则二：设施内任何物品在使用前后都需要清洁消毒，并摆放整齐；

原则三：动物房内同一空间下的门不可同时打开；

原则四：所有实验小鼠都需要登记入饲养繁育系统，笼牌张贴二维码；

 

 

 

 

 

人员进出设施步骤

人员进

1. 人员只允许从一更二更进出；
2. 进入一更前：在实验室扎头发、洗手（杀菌洗手液）；
3. 进入一更：挂外套、放门禁卡和手机等物品、登记进入时间、消毒液净手（雨伞放在门外鞋架上，不要带太多东西进入一更）；
4. 进入二更：检查隔离服，有破损或者拉链坏的直接淘汰至指定位置，照镜子佩戴好口罩、发套（男女、头发长短都要戴）、隔离服（注意衣服的大中小）、手套（要压实衣袖，防止裸露手臂皮肤）；
5. 穿戴好后用消毒液喷瓶对风淋门把手和自己的手消毒，拉开门进入风淋；
6. 进入风淋以后将双臂举起10S，并左右缓慢晃动身体，让风均匀吹遍全身，放下手臂，适当抬腿、下蹲直至风淋结束（全程30s）；
7. 出风淋后取用鞋架上的拖鞋（三楼的鞋架在操作间进门右侧），使用后的拖鞋不要带出动物房，应丢入鞋架旁回收框中；
8.  

人员出

1. 人员出动物房前应用消毒液净手后打开风淋里侧门，进入风淋（不用吹风）；
2. 从风淋退出到二更后，摘掉一只手套，打开门退出至一更（禁止戴手套开关二更门，防止手套携带动物毛发和体液交叉感染）
3. 在一更脱下另一只手套、口罩、发套并丢弃在一更垃圾桶内，拿好随身物品出一更，务必确认门已关好；
4. 将脱下来的隔离服丢入回收桶中（位置：一二楼梯中间）；

 

人员进出注意事项

1. 隔离服不可反复使用，使用过一次后就应该丢入脏衣回收桶中；
2. 未经培训人员不可以进入设施，也不可以由已有权限人员带入；
3. 请勿光脚进入设施，地面为次清洁区域；
4. 请勿穿戴非设施提供的防护用品（N95口罩或自带实验室手套等）
5. 请勿进入动物中心的饲养房间和使用他们的物品和工具；
6. 一次性手套破损应立即更换（退到二更更换）；
7. 动物房内每开一道门都应该随手关好门，不可以留缝隙，任何两扇门不可以同时开；
8. 进入所有房间前都应洗手，做实验结束后洗手再出动物房；
9. 进入过其他动物设施，请隔离三天后再进去中心动物设施；

 

物品进出设施步骤

物品进

1. 传递仓只进不出，缓冲间只出不进，特殊情况（大件灭菌物品）可以反向操作（除了特殊情况均需向管理员申请）；
2. 传入物品要对照《灭菌方式清单》上面的灭菌方式进行操作，清单中没有的物品需询问管理员，由管理员告知灭菌方式后传入，管理员将该物品补至清单中（需高压物品需提前放置在903灭菌锅左侧铁架上，禁止在实验室灭菌锅自行灭菌）；
3. 传递仓传入物品时，应先用消毒液对外部喷洒消毒再打开仓门，放置好物品喷消毒液，关好仓门，按下紫外开关（自动20min熄灭），20min后在设施内打开内部仓门取出物品并关严仓门；

物品出

1. 非特殊情况，物品应从缓冲间传出，确认缓冲间对向门未开启且紫外已经熄灭后，打开缓冲间里侧门，将物品放入，放入物品后应将门反锁；
2. 从缓冲间外侧取出物品前，用先用喷瓶对外部喷洒消毒，打开缓冲间，取出物品后用泡过消毒液的拖布拖地并关好外侧门，旋转紫外灯至20min；
3. 洁净物品与脏笼盒等非洁净物品不应混放共存于缓冲间。
4. 传入出的物品需在登记本登记传入时间

 

物品进出注意事项

1. 熟记各种推车的使用范围：层板车（缓冲间及以内）  双层推车（缓冲间内门以内）  手扶推车（缓冲间外面以外）换笼车（内外分开用，里侧不可进缓冲间，外侧也不可进入缓冲间）；
2. 待出小物品（剪好脚趾的ep管）也要从缓冲间出去，不要塞进裤兜从风淋出去。设施内的拖鞋，手机和门禁卡一旦被自己误带出，请自己立即照紫外并放置到原处。
3. 向设施内传送试剂时，不可带包装或测序袋进入，应去除最小外包装包装再喷消毒液；小鼠运输盒粘的发票信封也需去除。
4. 塑料笼牌不可以反复使用，小鼠处理后不应将原塑料笼牌留在动物房内，应随待处理的笼盒一并带出动物房；
5. 脏笼盒要分类放置，盒底，铁丝网，盒盖，水瓶，有脏垫料的笼盒要盖好盖子。塑料笼牌应该放置在干净的盒底传出去。
6. 缓冲间内门用完反锁；

 

小鼠进出

进二楼

1. 外面购入的小鼠进二楼（只限集萃药康和维通利华）：

对纸箱6个面充分喷洒消毒，不可以有干燥的区域，将传递仓外侧门打开，仓体内部整体喷洒消毒（注意不要喷到紫外灯管），迅速将消毒后的纸箱放入传递仓中，关紧仓门，静置5min以上；在动物房小辅房内接鼠，准备好干净笼盒、笼牌，将小鼠取出置于干净笼盒中，到饲养室打开换笼台，喷洒消毒整个操作区域，进行添加饲料、饮水等操作，购鼠的纸箱留在传递仓中，不可带入动物房。出动物房后将纸箱拿到洗刷间。

2. 若外面购入的小鼠进二楼，纸箱过大放不进传递仓，走缓冲间进，报备管理员后方可操作：

对纸箱6个面充分喷洒消毒，不可以有干燥的区域，将缓冲间外门打开，迅速将消毒后的纸箱放入缓冲间中静置5min以上，注意放在缓冲间里侧门口即可，人不要走进去；在动物房内缓冲间门口接鼠，然后进去饲养间打开换笼台，喷洒消毒整个操作区域，进行添加饲料、饮水等操作，纸箱直接经缓冲间传出。

进三楼

1. 外面买入的小鼠进三楼（只限集萃药康和维通利华）：

对纸箱6个面充分喷洒消毒，不可以有干燥的区域，对传递仓外部空气及传递仓内部、仓门充分喷洒消毒，将纸箱放入静置5min以上；准备好推车，推车使用前喷洒消毒，将纸箱置于推车上，推回操作间进行拆分，接鼠后进去饲养间进行添加饲料、饮水等操作，结束后应及时将纸箱经缓冲间传出。

2. 若外面购入的小鼠进三楼，纸箱过大放不进传递仓，走缓冲间进，报备管理员后方可操作：

对纸箱6个面充分喷洒消毒，不可以有干燥的区域，将缓冲间外门打开，迅速将消毒后的纸箱放入缓冲间中静置5min以上，注意放在缓冲间里侧门口即可，人不要走进去；在动物房内接鼠，将纸箱置于推车上，推回操作间进行拆分，接鼠后进去饲养间进行添加饲料、饮水等操作，结束后应及时将纸箱经缓冲间传出。

二三楼互传

1. 二楼向三楼传送小鼠：

小鼠从二楼传入三楼前，在动物房内应使用已高压灭菌的打包袋将鼠笼打包好，扎紧袋口，从缓冲间传出；将装有笼盒的打包袋送至三楼传递仓门口，对袋子充分喷洒消毒，对传递仓外部空气喷洒消毒，打开传递仓外侧门，对传递仓内部及仓门充分喷洒消毒，放入装有笼盒的打包袋，关紧外侧仓门，静置5min以上；在动物房内侧，打开传递仓，去掉打包袋，取出鼠笼，将打包袋留在传递仓中，关好内侧仓门。将鼠笼推至操作间拆分，接鼠后进去饲养间进行添加饲料、饮水等操作，结束后应及时将旧笼盒经缓冲间传出。

2. 三楼向二楼传送小鼠（暂不支持）：

小鼠从三楼传入二楼前，在动物房内应使用已高压灭菌的打包袋将鼠笼打包好，扎紧袋口，从缓冲间传出；将装有笼盒的打包袋送至二楼传递仓门口，对袋子充分喷洒消毒，对传递仓外部空气喷洒消毒，打开传递仓外侧门，对传递仓内部及仓门充分喷洒消毒，放入装有笼盒的打包袋，关紧外侧仓门，静置5min以上；在动物房内侧，打开传递仓，去掉打包袋，取出鼠笼，将打包袋留在传递仓中，关好内侧仓门（结束后传出至洗刷间）。将鼠笼推至饲养间拆分，打开换笼台，喷洒消毒整个操作区域，进行添加饲料、饮水等操作，结束后应及时将旧笼盒经缓冲间传出。

 

小鼠进出注意事项

小鼠进设施要求：

订购小鼠来源	进设施要求	是否抽检
二楼进三楼	1.《外来小鼠准入申请表》	否
合作供应商	1.《外来小鼠准入申请表》 2. 随运输盒文件/信封	是，低频率抽检 抽检费用平台自理
其他来源	1.《外来小鼠准入申请表》＋2. 随运输盒文件/信封 3. 小鼠所在笼架哨兵鼠微生物检测报告	是，高频率抽检 抽检费用课题组自理

 

小鼠出设施要求：

1. 小鼠拿出设施后不可再进入设施；
2. 小鼠拿出设施后请勿饲养在实验室，请勿过夜存放；
3. 脏笼具使用完请归还置动物房洗刷间；
4. 安操作步骤将小鼠安乐死

实验操作注意事项

 

1. 动物房内统一供应消毒液，笔，小鼠笼牌卡，打印耗材，平板，手机，厨房纸。除此之外的实验耗材（ep管，枪头，酒精棉，各类器械等）皆由各课题组自行准备，可高压灭菌物品放置到三楼灭菌锅旁货架，操作员会自行灭进三楼。各课题组统一放置并标记归属，切勿随意挪用他人物品；
2. 设施内地面为次清洁区域，一切洁净物品或小鼠不可置于地面上。小鼠逃逸后请处理。
3. 做完实验后，除桌面整洁，请清理地面上掉落的垫料和粪便。
4. 不要使用厚记录本，尽量脱离纸质记录；
5. 废旧利器应丢入利器桶，注意丢入利器后应将盖子旋回至关闭状态；
6. 动物房内通电的各种仪器设备使用后要彻底断电（除24小时通电设备）；
7. 做实验的小鼠从笼盒取出后要迅速盖好笼盒盖，送回饲养室之前要对笼盒6个面仔细喷洒消毒；
8. 操作必须在实验桌或者操作车上完成，严禁直接在地上进行操作，笼盒等物品亦禁止摆放于地面（待传出的脏笼盒等污物除外；
9. 遵照已过审的AP和相关SOP执行动物实验操作；
10. 将实验过程中产生的利器放入利器盒中，废弃物经由缓冲间带离动物设施；
11. 遇到设施故障，房间温湿度异常，他人违规等情况立即向管理员汇报；
12. 用完的物品一定要整齐摆放，操作台，推车面都彻底消毒擦拭；
13. 笼牌信息一定要完整，负责人，品系，二维码。信息不全将会通报以及会产生更多的费用；

 

 

繁育操作注意事项

 

1. 笼牌卡上负责人、品系名称、基因名称、出生日期等信息必须写全，贴二维码便于信息化管理；
2. 负责人的名字和联系电话需标记清楚；
3. 做限制性饮食等需要禁食禁水的实验时，应在笼牌上清楚标记，否则一律按需要添加饲料和饮水处理；
4. 繁殖笼只能1配1或者1配2；除哺乳期繁殖笼外每笼饲养量不超过6只（三楼的笼盒）；
5. 1配多见栓怀孕后雌鼠必须取出，每笼中生育后代雌鼠≤2；
6. 新生小鼠需25天前分笼；

 

违规处理

1. 凡完成中心动物设施培训者，皆授以 12 分权限分，课题组得分N/2(N为课题组已培训人数)所有人应遵守动物设施相关规章制度，自觉维护动物设施内洁净安全。若有违规者，按照情节严重进行扣分和警告，有扣分行为产生时，邮件通知到责任人及负责导师，在公示屏公示一周。扣满 12 分即取消权限一个月。一个月后可重新申请培训考核。
2. 计分以1年为1周期，每年 9 月 30  日重置计分，因扣分重新获取权限者授以 6 分。

 

1. 违规扣分项
2. 10分项；扣分原则：严重影响动物设施的正常运行，严重违反人员物品进出原则，威胁生物安全；此项违规将取消门禁权限一个月。（A项）
3. 将未经报备，许可或已暴露于外界空气外来动物私自带入动物设施，并将取消门禁一个月；
4. 禁止带无权限人员进入，无权限人员半年内禁止申请进入动物设施；
5. 未通过 AP 审核私自开展动物实验；
6. 存在严重违反动物福利与伦理要求的行为（如：未确认动物完全死亡将其直接存入冰箱、非实验目的戏虐动物、涉及动物手术时未施加麻醉方案等）；
7. 未穿戴口罩、手套、隔离服等进入动物设施区域；
8. 未经许可擅自将放射性、传染性、剧毒物品等带入动物设施环境；
9. 擅自携带未经灭菌消毒的物品进入动物设施区域；
10. 未经允许，擅自取用他人实验动物；
11. 人员擅自从缓冲间进出设施，物品从更衣室带进出；
12. 从清洁级别动物设施进入 spf 级设施前未经 3 天隔离期；
13. 外购动物到达后未及时传入动物设施，致动物在动物设施外过夜；
14. 5分项；扣分原则：未遵循规定，行为存在安全隐患，违反动物福利原则。（B项）
15. 穿隔离服离开动物设施外后又折返；
16. 擅自将未经使用的饲料、垫料、口罩、手套等动物饲养相关物资带出私用；
17. 未按规范要求向动物设施内传递物品者（如，不规范使用传递窗和缓冲间等）；
18. 未按照已过审 AP 执行动物实验操作；
19. 实验结束后不及时按照规范处理实验动物，或动物尸体未及时处理存放于设施内冰箱中；
20. 未与他人商量随意占用他人笼位；
21. 随意开关动物饲养间照明，扰乱实验动物昼夜节律；
22. IVC笼盒使用不规范，动物放到笼架时，未放置饲料或饮水瓶者，未将笼盒推到底，导致笼盒内不通气者；
23. 在动物设施环境饲养间地面上进行动物操作，或造成小鼠逃逸未及时通知或抓回；
24. 发生其他错误行为并在饲养管理人员或其他实验人员提醒之后，坚持错误做法不改正者
25. 动物房空调机组停机期间进入动物房；
26. 实验小鼠在实验室过夜，脏笼具存放于实验室；
27. 小鼠逃逸后未及时处理；
28. 2分项；扣分原则：违反人员进出，饲养和操作的基本要求。（C项）
29. 笼牌未按要求贴二维码、填写信息（出现打印系统故障可在笼牌标注）或实际信息和系统信息不对称（如 a 笼牌贴在 b 笼盒），以上皆加罚一个月笼位费；
30. 未按规定穿戴好防护物品；
31. 实验期间产生的利器（包括注射器、针头、玻璃等）未及时按规定处理。如造成人员损伤应酌情加重扣分分值；
32. 未经同意擅自取用他人或课题组的实验用品对他人工作造成影响；
33. 进出动物房，使用传递仓，缓冲间时未进行登记者，安乐死小鼠存放时未进行登记者；
34. 实验结束后未及时清理并消毒操作台面或手推车者，地面遗留小鼠粪便和垫料；
35. 动物出现严重健康状态异常或饲养笼内严重超量接到通知后 48h  无响应，或擅自摘取或转移提示牌；
36. 繁殖笼未及时分笼（超过 25 天）
37. 进出动物设施未随手关门；设备间使用后未关门；冰箱冰柜未关门；
38. 未经批准在非规定时间进入动物设施；
39. 将小鼠，实验器具，干净笼具放在地面上，实验人员坐在地面上；
40. 在动物设施内手套破损后未及时更换；
41. 离开前未将使用过的隔离服、手套、口罩放置在指定位置；4.3.13   置物柜违规使用：摆放脏乱，擅自挪用；
42. 冰箱内存放物品未登记，未在标记所有人，试剂名称；
43. 在各类笼具上涂写和标记，粘胶带等；
44. 动物房不可使用纱线类手套；
45. 补充说明
46. 若出现违规事件，结合实际情况做出惩罚；
47. 其它上述未说明的事件，详细描述事件经过，按照扣分原则进行扣分；
48. 若主动发现安全隐患或其他违规行为，经查实，可根据实际情况予以分值抵扣奖励；
49. 本中心学生违规扣分与国合平台补助挂钩；
50. 非中心人员（合作学生，客户）同样适用本违规处理办法；
51. 短期（半年以内）进入设施人员授权分减半；

 

 

 

物品灭菌方式对照表

高压	辐照	泡消毒液照紫外	喷消毒液照紫外	喷消毒液
实验用微尘擦拭纸	各种笔	酒精棉球	胚胎测试水	麻醉剂
厨房用纸	各种胶带	密封包装无菌培养皿	0.22um过滤灭菌头	IVF试剂
置物用笼盒			冻存用泡沫盒内带液氮（需标记液氮危险字样）	激素
切针用砂轮			75%酒精	散瞳剂
普通培养皿			附睾尾	抗凝剂
锥形管架			过滤器	葡萄糖
EP管板架			房间高效
冰盒			U盘/移动硬盘
移交记录纸			相机及三脚架（相机包不要带入）
笼牌			电脑
手术剪、剪刀			血糖试纸
EP管			电池
擦镜纸			体重秤
EP管管架			听力电极
手术器械			移液枪
生理盐水			已灭菌移液器枪头
枪头			冲胚针头
离心管			玻璃针
板子			硅胶
果冻			已灭菌手术缝合线、针
抹布			已灭菌一次性注射器
镊子			已灭菌冻精细管/冻存管/冻精套管
移交小鼠的白盒子			毛细管
记录本
采血枪尖

灭菌清单上面没有的物品需跟管理员确认灭菌方式。